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            薄層色譜儀的具體實驗步驟精講

            發布時間:2020-10-24    點擊次數:453
               薄層色譜儀是專為薄層色譜(或類似薄層色譜)配套的儀器,它較好地運用了現代數碼照相技術和圖像定量分析軟件,將薄層色譜中的信息定性與定量準確地反映出來??蓪Ρ由V圖譜進行即時觀察、即時拍照、即時保存、即時定量分析,報告各種定量數據。
              薄層色譜儀進行實驗的具體步驟:
              1.薄層板制備
              除另有規定外,將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合,去除表面的氣泡后,倒入涂布器中,在玻板上平穩地移動涂布器進行涂布(厚度為0.2-0.3mm),取下涂好薄層的玻板,置水平臺上于室溫下晾干,后在110℃烘30分鐘,即置有干燥劑的干燥箱中備用,用前檢查其均勻度。
              2.點樣
              除另有規定外,用點樣器點樣于薄層板上,一般為圓點,點樣基線距底邊2.0cm,樣點直徑及點間距離同紙色譜法,點間距離可視斑點擴散情況以不影響檢出為宜。點樣時必須注意勿損傷薄層表面。
              3.展開
              展開室如需預先用展開劑飽和,可在室中加入足夠量的展開劑,并在壁上貼二條與室一樣高、寬的濾紙條,一端浸入展開劑中,密封室頂的蓋,使系統平衡或按規定操作。將點好樣品的薄層板放入展開室的展開劑中,浸入展開劑的深度為距薄層板底邊0.5-1.0cm,密封室蓋,待展開至規定距離,取出薄層板,晾干,按各品種項下的規定檢測。
              4.如需用薄層色譜儀對色譜斑點作掃描檢出,或直接在薄層上對色譜斑點作掃描定量,則可用薄層掃描法。薄層掃描的方法,除另有規定外,可根據各種薄層掃描儀的結構特點及使用說明,結合具體情況,選擇吸收法或熒光法,用雙波長或單波長掃描。由于影響薄層掃描結果的因素很多,故應在保證供試品的斑點在一定濃度范圍內呈線性的情況下,將供試品與對照品在同一塊薄層上展開后掃描,進行比較并計算定量,以減少誤差。各種供試品,只有得到分離度和重現性好的薄層色譜,才能獲得滿意的結果。

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